TIÊU CHUẨN QUỐC GIA

TCVN 12431:2018

EN 15791:2009

THỨC ĂN CHĂN NUÔI - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG DEOXYNIVALENOL - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO SỬ DỤNG DETECTOR UV VỚI LÀM SẠCH BẰNG CỘT ÁI LỰC MIỄN NHIỄM

Foodstuffs - Determination of deoxyvinalenol in animal feed - HPLC method with immunoaffinity column clean-up

Lời nói đầu

TCVN 12431:2018 hoàn toàn tương đương với EN 15791:2009;

TCVN 12431:2018 do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F17 Thức ăn chăn nuôi biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố.

THỨC ĂN CHĂN NUÔI - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG DEOXYNIVALENOL - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO SỬ DỤNG DETECTOR UV VỚI LÀM SẠCH BẰNG CỘT ÁI LỰC MIỄN NHIỄM

Foodstuffs - Determination of deoxyvinalenol in animal feed - HPLC method with immunoaffinity column clean-up

1  Phạm vi áp dụng

Tiêu chuẩn này có thể áp dụng để xác định hàm lượng deoxynivalenol (DON) nồng độ từ 150 μg/kg đến 4 000 μg/kg trong thức ăn chăn nuôi hỗn hợp.

2  Tài liệu viện dẫn

Các tài liệu viện dẫn sau là rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có).

TCVN 4851 (ISO 3696), Nước dùng trong phân tích phòng thí nghiệm - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử.

3  Nguyên tắc

Deoxynivalenol (DON) được chiết ra khỏi mẫu bằng nước. Dịch chiết trong nước được làm sạch bằng cột ái lực miễn nhiễm để loại bỏ các tạp chất. DON sau đó được định lượng bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) với detector UV.

4  Thuốc thử

Trong quá trình phân tích, chỉ sử dụng các thuốc thử loại tinh khiết phân tích và nước cất hai lần hoặc nước loại 1 trong TCVN 4851 (ISO 3696), trừ khi có quy định khác. Dung môi hữu cơ phải đạt chất lượng dùng cho phân tích HPLC.

4.1  Axetonitril

CẢNH BÁO - Axetonitril là chất nguy hại và khi xử lý phải thực hiện trong tủ hút. Phải mang thiết bị bảo vệ thích hợp (áo choàng, kính, găng tay).

4.2  Deoxynivalenol (DON), có độ tinh khiết tối thiểu là 97 % khối lượng

CẢNH BÁO - Deoxynivalenol là chất có tính độc cao. Luôn phải đeo găng tay và kính an toàn và phải tiến hành tất cả các giai đoạn chuẩn bị mẫu và chuẩn bị các chất chuẩn trong tủ hút.

4.3  Metanol

CẢNH BÁO - Metanol là chất độc và khi xử lý phải thực hiện trong tủ hút. Phải mang thiết bị bảo vệ thích hợp (áo choàng, kính, găng tay).

4.4  Axit axetic băng

CẢNH BÁO - Axit axetic băng là chất nguy hại và khi xử lý phải thực hiện bên trong tủ hút. Luôn phải mang thiết bị bảo vệ thích hợp (áo choàng, kính, găng tay).

4.5  Pha động

Trộn 15 phần thể tích metanol (4.3) với 84,9 phần thể tích nước và 0,1 phần thể tích axit axetic băng (4.4). Lượng chính xác metanol và axit axetic được sử dụng phụ thuộc vào cột HPLC được chọn để phân tích và phải được điều chỉnh, nếu cần. Loại khí dung dịch này trước khi sử dụng.

4.6  Dung môi rửa

Trộn 50 phần thể tích metanol (4.3) với 50 phần thể tích nước.

4.7  Dung dịch gốc DON, 250 pg deoxynivalenol/mililit axetonitril.

Cho 4,0 ml axetonitril (4.1) vào 5 mg DON (4.2) để tạo thành dung dịch có nồng độ 1,25 mg/ml. Pha loãng 1 000 μl dung dịch nồng độ 1,25 mg/ml đến 5,0 ml bằng axetonitril để tạo thành dung