TIÊU CHUẨN QUỐC GIA

TCVN 13286:2021

CHẾ PHẨM ENZYM - XÁC ĐỊNH HOẠT ĐỘ GLUCOAMYLASE BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ HẤP THỤ PHÂN TỬ

Enzyme preparations - Determination of glucoamylase activity by spectrophotometric method

Lời nói đầu

TCVN 13286:2021 được xây dựng trên cơ sở tham khảo AOAC 994.09 Glucoamylase activity in industrial enzyme preparations. Colormetric enzymatic method;

TCVN 13286:2021 do Viện Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm quốc gia biên soạn, Bộ Y tế đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố.

CHẾ PHẨM ENZYM - XÁC ĐỊNH HOẠT ĐỘ GLUCOAMYLASE BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ HẤP THỤ PHÂN TỬ

Enzyme preparations - Determination of glucoamylase activity by spectrophotometric method

CẢNH BÁO: Việc áp dụng tiêu chuẩn này có thể liên quan đến các vật liệu, thiết bị và các thao tác nguy hiểm. Tiêu chuẩn này không thể đưa ra được hết tất cả các vấn đề an toàn liên quan đến việc sử dụng chúng. Người sử dụng tiêu chuẩn này phải tự thiết lập các thao tác an toàn thích hợp và xác định khả năng áp dụng các giới hạn quy định trước khi sử dụng tiêu chuẩn.

1  Phạm vi áp dụng

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp xác định hoạt độ glucoamylase trong chế phẩm enzym công nghiệp bằng quang phổ hấp thụ phân tử.

Giới hạn định lượng của phương pháp là 0,1 U/g.

2  Thuật ngữ và định nghĩa

Trong tiêu chuẩn này áp dụng thuật ngữ và định nghĩa sau:

2.1

Đơn vị hoạt độ glucoamylase (unit of glucoamylase activity)

U

Lượng glucoamylase xúc tác để, giải phóng 0,1 pmol p-nitrophenol (PNP) trong thời gian 1 min từ cơ chất p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside (PNPG) ở nhiệt độ 50 °C, pH 4,3.

3  Nguyên tắc

Thuốc thử PNPG được enzym glucoamylase thủy phân ở nhiệt độ 50 °C, pH 4,3 thành PNP và glucose. Định lượng PNP được giải phóng trên mỗi đơn vị thời gian dựa vào PNP chuẩn, giá trị này được sử dụng để tính hoạt độ của enzym.

4  Thuốc thử

Sử dụng các thuốc thử tinh khiết phân tích, nước sử dụng là nước cất hoặc nước có chất lượng tương đương, trừ khi có quy định khác.

4.1  Dung dịch natri cacbonat, 0,3 M

Hòa tan 15,9 g natri cacbonat (Na₂CO₃) vào nước, thêm nước đến 500 mL.

4.2  Dung dịch đệm axetat, 0,1 M

Hòa tan 4,4 g natri axetat trihydrat (C₂H₃NaO₂.3H₂O) vào khoảng 800 mL nước, thêm 4,5 mL axit axetic băng. Chỉnh đến pH 4,5 ± 0,05 (sử dụng natri axetat hoặc axit axetic băng). Pha loãng bằng nước đến 1 L.

CHÚ THÍCH: Đối với các chế phẩm enzym có nguồn gốc từ Aspergillus oryae hoặc Rhizopus oryzae, chỉnh đến pH 5,0 ± 0,05.

4.3  Dung dịch chuẩn p-nitrophenol (PNP)

CẢNH BÁO: Tránh tiếp xúc với da. Nế